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        • 堿性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒 糖代謝
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        • 堿性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒 糖代謝
        產(chǎn)品名稱:

        堿性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒 糖代謝

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-07-09
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        中文名稱
        堿性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒 糖代謝
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Alkaline Xylanase(BAX)Activity Assay Kit
        別名
        堿性木聚糖酶試劑盒 堿性木聚糖酶測(cè)試盒
        檢測(cè)方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/48S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC3615
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測(cè)定意義:木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


        堿性木聚糖酶(BAX)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
        微量法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
        貨號(hào):BC3615
        規(guī)格:100T/48S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        緩沖液液體70 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體8 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二液體12 mL×1瓶2-8℃保存
        標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 標(biāo)準(zhǔn)品:10mg木糖。臨用前加入667μL蒸餾水配制成100μmol/mL的木糖標(biāo)準(zhǔn)液,2-8℃保存8周。

        產(chǎn)品說(shuō)明:
        木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖,降低釀造中物料的粘度,促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中,堿性木聚糖酶(BAX)一般分離自最適生長(zhǎng)pH9-11的微生物。
        BAX在堿性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計(jì)算BAX活力。


        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
        需自備的儀器和用品:
        可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、低溫離心機(jī)、水浴鍋、研缽/勻漿器、蒸餾水。
        操作步驟:具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)
        1、發(fā)酵液:發(fā)酵液于8000rpm4℃,離心15min,取上清,置冰上作為待測(cè)樣本。
        2、組織樣本:稱0.1g組織,加入1mL緩沖液,冰上充分研磨。4℃,8000rpm離心15min,取上清置冰上待測(cè)。
        3、酶干粉:稱1mg,加1mL緩沖液溶解后置冰上待測(cè)。
        注:含還原糖較高的樣本(如植物果實(shí)等)可用蒸餾水進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。
        二、測(cè)定步驟

        1. 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm,分光光度計(jì)用蒸餾水調(diào)零。

        2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋:臨用前按下表將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為6、5、4、3、21μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè)。

        序號(hào)稀釋前濃度(μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)品體積(μL蒸餾水體積(μL稀釋后濃度(μmol/mL
        110010090010
        210120806
        3101001005
        410801204
        510601403
        610401602
        710403601

        備注:實(shí)驗(yàn)中每管需要60μL。

        1. 樣本測(cè)定(在EP管中加入下列試劑)

        試劑名稱(μL對(duì)照管測(cè)定管空白管標(biāo)準(zhǔn)管
        樣本6060--
        標(biāo)準(zhǔn)品---60
        蒸餾水--60-
        緩沖液90909090
        試劑一-606060
        渦旋混勻,置于50℃水浴鍋中反應(yīng)30min,立即沸水浴中10min滅活。(注意不要讓蓋子爆開(kāi),以免進(jìn)水,改變了反應(yīng)體系)
        試劑一60---
        試劑二90909090
        渦旋混勻,沸水浴中準(zhǔn)確顯色5min(注意不要讓蓋子爆開(kāi),以免進(jìn)水改變了反應(yīng)體系),冷卻至室溫后,吸取200μL96孔板或微量玻璃比色皿中,盡快測(cè)定各管540nm下的吸光度,分別記為A對(duì)照、A測(cè)定、A空白、A標(biāo)準(zhǔn)。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白??瞻坠芎蜆?biāo)準(zhǔn)曲線只需測(cè)1-2次。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。


        注意事項(xiàng):
        吸光度變化應(yīng)該控制在0.01~1.2之間,否則加大樣本量或稀釋樣本,注意同步修改計(jì)算公式中的稀釋倍數(shù)。
        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取0.1179g橙子加入1mL緩沖液進(jìn)行勻漿研磨,取上清用蒸餾水稀釋10倍后按照測(cè)定步驟操作,用96孔板測(cè)得ΔA測(cè)定=A測(cè)定- A對(duì)照=1.194-1.040=0.154,帶入標(biāo)曲y=0.2017x-0.1171(R2=0.999),計(jì)算x=1.344,按樣本質(zhì)量計(jì)算BAX活性得:BAX活力(U/g 質(zhì)量)= x÷W2÷30×F =1.344÷0.1179÷30×10=3.80 U/g 質(zhì)量。

        2. 取泡菜汁離心取上清按照測(cè)定步驟操作,用96孔板測(cè)得ΔA測(cè)定=A測(cè)定- A對(duì)照=0.925-0.169=0.756,帶入標(biāo)曲y=0.2017x-0.1171(R2=0.999),計(jì)算x=4.329,按發(fā)酵液計(jì)算BAX活力得:BAX活力(U/mL= x÷T×F =4.329÷30×1=0.144U/mL。

        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC2600/BC2605  酸性木聚糖酶(ACX)活性檢測(cè)試劑盒
        BC2590/BC2595  中性木聚糖酶(NEX)活性檢測(cè)試劑盒
        BC2620/BC2625  β-木糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒

        堿性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒 糖代謝 堿性木聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒 糖代謝

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