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品牌	SOLARBIO/索萊寶	CAS	詳詢
分子式	詳詢	純度	詳詢
分子量	詳詢	貨號	BC0820
規(guī)格	50T/24S	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	測定意義：乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種	應用領域	環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁,綜合

幾丁質酶活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC0820
規(guī)格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體30 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體15mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體12 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體5mL×1瓶	2-8℃保存
試劑四A	粉劑×2瓶	2-8℃保存
試劑四B	液體70mL×1瓶	2-8℃保存
標準品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：此試劑為懸濁液，使用前需搖勻；
試劑三：飽和溶液，低溫（2-8℃）條件取出會有晶體析出，60℃加熱使其溶解即可；
試劑四：臨用前取一瓶試劑四A，加入32mL試劑四B中，充分溶解，現(xiàn)用現(xiàn)配。用不完的試劑2-8℃可以保存4周（試劑四B若有結晶可37℃促進溶解）；
標準品：5mg N-乙酰氨基葡萄糖。臨用前加入 1mL 試劑一配制成 5mg/mL 的標準溶液，即5000μg/mL的標準溶液，2-8℃可以保存4 周。

產品說明：
幾丁質酶主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官（例如烏賊的軟骨），以及真菌類的細胞壁中。而幾丁質酶（EC 3.2.1.14）可催化幾丁質水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點。
幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖，N-乙酰氨基葡萄糖與堿共熱產生的中間化合物可進一步與對二甲*甲醛反應產生顯色物質，該顯色物質在585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

注意事項：

反應結束后盡快進行比色。
吸光值大于1.5或者ΔA大于1時，樣本用提取液適當稀釋再測定或者縮短37℃酶促反應時間，注意計算公式修改；若ΔA小于0.01時，可以延長第一步37℃反應時間或者加大樣本的加入量，注意修改計算公式。

實驗實例：

取0.111g蝦殼加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得計算ΔA=A測定-A對照=0.767-0.008=0.759，帶入標曲y=0.0087x+0.0021，得出x=87.0μg/mL，按樣本質量計算酶活得：

幾丁質酶活性（U/g 質量）=2.5×x÷W =1959.5 U/g 質量。

取0.113g平菇加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得計算ΔA=A測定-A對照=0.918-0.01=0.908，帶入標曲y=0.0087x+0.0021，得出x=104.126μg/mL，按樣本質量計算酶活得：

幾丁質酶活性（U/g 質量）=2.5×x÷W =2303.7 U/g 質量。
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