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        • 考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白含量測(cè)定 試劑盒
        產(chǎn)品名稱:

        考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白含量測(cè)定 試劑盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-07-09
        考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白含量測(cè)定 試劑盒

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶

        考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白含量測(cè)定 試劑盒說(shuō)明書
        酶標(biāo)法 100 管/96 樣
        產(chǎn)品簡(jiǎn)介 :
        樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計(jì)算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。
        在酸性溶液中,考馬斯亮藍(lán) G-250 與蛋白質(zhì)結(jié)合形成藍(lán)色復(fù)合物;該復(fù)合物在 595nm 處有大吸收峰,
        其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比。該方法靈敏度高,適合微量蛋白質(zhì)分析。
        試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
        酶標(biāo)儀、酶標(biāo)板、移液器和蒸餾水。
        產(chǎn)品內(nèi)容 :
        試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。
        標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1 瓶,4℃保存。
        操洽步驟 :
        一 、 樣品中可溶性蛋白質(zhì) 提取 :
        液體樣品:澄清無(wú)色液體樣品可以直接測(cè)定。
        組織樣品:準(zhǔn)確稱取約 0.1 g 樣品,加 1mL 提取液( 自備,根據(jù)需要可以是酶提取緩沖液或者蒸餾水或
        者生理鹽水) ,冰浴勻漿,10000rpm,4℃離心 10min,取上清,即待測(cè)液。 (動(dòng)物樣品常常需要稀釋)
        二 、 吸光值測(cè)定 :
        1. 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 595nm,蒸餾水調(diào)零。
        2.  空白 孔: 取酶標(biāo)板, 在空白孔中加入 20µL  蒸餾水, 180µL 試劑一, 混勻后室溫靜置 10min, 于 595nm
        測(cè)定吸光度,20min 內(nèi)完成測(cè)定,記為 A 空白。
        3.  標(biāo) 準(zhǔn) 孔: 取酶標(biāo)板, 在空白孔中加入 20µL  標(biāo)準(zhǔn)液, 180µL 試劑一, 混勻后室溫靜置 10min, 于 595nm
        測(cè)定吸光度,20min 內(nèi)完成測(cè)定,記為 A 標(biāo)準(zhǔn)。
        4.  測(cè)定 孔: 取酶標(biāo)板, 在空白孔中加入 20µL  待測(cè)液, 180µL 試劑一, 混勻后室溫靜置 10min, 于 595nm
        測(cè)定吸光度,20min 內(nèi)完成測(cè)定,記為 A 測(cè)定。
        蛋?質(zhì)含量 計(jì) 算 :
        C 待測(cè)(µg/m L)= C 標(biāo)準(zhǔn)×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)
        =50×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)
        C 標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)品蛋白質(zhì)濃度,50µg/mL。
        注意事項(xiàng) :
        1.加考馬斯亮藍(lán)后,在 10~20min 內(nèi)吸光值相對(duì)較穩(wěn)定,因此須在 10~20min 完成比色。
        2.不宜用石英比色皿,可用玻璃或塑料比色皿,測(cè)完成后立即用 95%乙醇( 自備)沖洗。
        3.測(cè)定前用 1~2 個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),確保蛋白濃度在 0~100µg/ml 范圍內(nèi),否則需要做相應(yīng)稀釋。

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