中性、堿性土壤速效磷含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號：BC2960
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：臨用前加入15 mL蒸餾水，溶解后2-8℃保存一周；

2. 試劑二：臨用前加入15 mL蒸餾水，溶解后2-8℃保存一周；

3. 標(biāo)準(zhǔn)品：10 μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)磷儲備液；

4. 工作液（定磷劑）的配制：按H₂O：試劑一：試劑二：試劑三=2:1:1:1的比例配制，配好的工作液應(yīng)為淺黃色。若變色則試劑失效，若是藍(lán)色則為磷污染，工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意：配試劑最好用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
產(chǎn)品說明：
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷組分，包括全部水溶性磷、部分吸附態(tài)磷、一部分微溶性的無機磷和易礦化的有機磷等，土壤中速效磷是限制植物生長主要因子之一。
用弱堿法提取堿溶性磷和吸附態(tài)磷，鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過測定660nm光吸收，即可計算磷含量。
技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0042 μmol/mL
線性范圍：0.015625-2 μmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
實驗中所需儀器和用品：
可見分光光度計、天平、臺式離心機、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、30-50目篩、漩渦震蕩儀、研缽、EP管、蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
新鮮土樣風(fēng)干，過30-50目篩，按照土壤質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：10-20的比例（建議稱取約0.05g土樣，加入1mL提取液），振蕩提取1h，10000g，25℃離心10min，取上清液待測。
二、測定步驟

1. 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至660nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 將10μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液用提取液稀釋為2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋表：

4. 操作表：(在1.5mL離心管中加入下列試劑)

三、速效磷含量計算

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

以各個標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸，其對應(yīng)的ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b，將ΔA帶入方程得到x（μmol/mL）

1. 速效磷含量的計算：

速效磷含量（μmol/g 土樣）=x×V樣÷（V樣×W÷V樣總）=x÷W
V樣：加入樣本體積，0.1mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質(zhì)量，g。
注意事項：
1、工作液（定磷劑）應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，正常顏色為淺黃色，如有變色或變藍(lán)則均為失效。
2、此法具有微量、靈敏、快速的特點。所以對測定所用試管或EP管等試驗器材均要求嚴(yán)格無磷。
3、顯色結(jié)束后應(yīng)立即檢測。
4、如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。
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