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        • 土壤酸性蛋白酶活性檢測(cè)試劑盒
        產(chǎn)品名稱:

        土壤酸性蛋白酶活性檢測(cè)試劑盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2025-04-24
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        中文名稱
        土壤酸性蛋白酶活性檢測(cè)試劑盒
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Soil Acid Protease Activity Assay Kit
        檢測(cè)方法
        可見分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/24S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC0860
        規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測(cè)定意義:土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        土壤酸性蛋白酶活性檢測(cè)試劑盒說明書
        可見分光光度法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
        貨號(hào):BC0860
        規(guī)格:50T/24S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        試劑一液體20 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×12-8℃保存
        試劑三液體12 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑四液體40 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑五液體10 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑六液體15 mL×12-8℃保存
        標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1支2-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 試劑二:臨用前加入10 mL試劑,沸水浴攪拌溶解后待用,用不完的試劑2-8保存1個(gè)月。

        2. 標(biāo)準(zhǔn)品:20μmol/mL 酪*酸溶液。

        產(chǎn)品說明:

        土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化,其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。土壤酸性蛋白酶在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。酸性條件下,土壤酸性蛋白酶可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪*酸;在堿性條件下,酪*酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán),在680nm有特征吸收峰。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
        需自備的儀器和用品:
        可見分光光度計(jì)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、臺(tái)式離心機(jī)、研缽、蒸餾水、30-50目篩。
        操作步驟:
        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))  
        新鮮土樣自然風(fēng)干或37烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
        二、測(cè)定步驟

        1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至680nm,蒸餾水調(diào)零。

        2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋:取10μL 20μmol/mL酪*酸標(biāo)準(zhǔn)液,加入990μL蒸餾水,充分混勻,配制成0.2μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液使用,現(xiàn)用現(xiàn)配。(實(shí)驗(yàn)中每管需要220μL,為減小實(shí)驗(yàn)誤差,故配制大體積。

        3. 樣本測(cè)定

        試劑名稱測(cè)定管對(duì)照管標(biāo)準(zhǔn)管空白管
        風(fēng)干土樣(g)0.10.1--
        試劑一(μL200200--
        試劑二(μL100
        --
        充分混勻后,37℃水浴/恒溫培養(yǎng)箱中反應(yīng)24h,期間振蕩5-6 次,使土樣與反應(yīng)液充分接觸。--
        試劑三(μL200200--
        試劑二(μL-100--
        混勻,10000rpm 室溫離心10min,取上清液待測(cè)--
        上清液(μL220220--
        0.2μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液(μL--220-
        蒸餾水(μL---220
        試劑四(μL650650650650
        試劑五(μL130130130130
        混勻,40℃水浴或恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)10min,10000rpm室溫離心10min,取上清液于680nm下讀取各管吸光值A,分別記為A測(cè)定管、A對(duì)照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管,計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。(標(biāo)準(zhǔn)管、空白管只需測(cè)1-2次,每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管

        三、土壤酸性蛋白酶活性計(jì)算
        單位定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1μmol的酪*酸為一個(gè)土壤酸性蛋白酶活力單位。
        土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)=C標(biāo)準(zhǔn)×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V反總÷W÷T=0.1×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W
        C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)管濃度,0.2μmol/mL;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.5mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1d;W:樣本質(zhì)量,g。
        注意事項(xiàng):
        當(dāng)吸光值大于1時(shí),建議將上清液用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算時(shí)注意乘以稀釋倍數(shù)。
        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 分別取2份0.1g土樣于1.5mLEP管中,分別為對(duì)照管及測(cè)定管。按照測(cè)定步驟操作,使用1mL玻璃比色皿測(cè)定吸光度,計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.206-0.178=0.028,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.540-0.028=0.512,按土壤質(zhì)量計(jì)算酶活得:

        土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.1×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W= 0.1×0.028÷0.512÷0.1= 0.0547U/g土樣。

        1. 分別取2份0.1g三葉草土樣于1.5mLEP管中,分別為對(duì)照管及測(cè)定管。按照測(cè)定步驟操作,使用1mL玻璃比色皿測(cè)定吸光度,計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.831-0.612=0.219ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.540-0.028=0.512,按土壤質(zhì)量計(jì)算酶活得:

        土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.1×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W= 0.1×0.219÷0.512÷0.1=0.0313 U/g土樣。
        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0270/BC0275 土壤中性*白酶活性檢測(cè)試劑盒
        BC0880/BC0885 土壤堿性蛋白酶(S-ALPT)活性檢測(cè)試劑盒

        土壤酸性蛋白酶活性檢測(cè)試劑盒


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