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        • ATP含量檢測(cè)試劑盒 微量法
        • ATP含量檢測(cè)試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        ATP含量檢測(cè)試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2025-04-24
        儲(chǔ)存條件
        -20℃
        中文名稱
        ATP含量檢測(cè)試劑盒 微量法
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        推薦
        若使用96孔板測(cè)定,需使用96孔UV板,推薦貨號(hào)YA0602
        英文名稱
        ATP Content Assay Kit
        檢測(cè)方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/96S
        自備試劑
        該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC0305
        規(guī)格100管/96樣供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途ATP含量檢測(cè)試劑應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


        ATP含量檢測(cè)試劑盒說明書
        微量法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
        貨號(hào)BC0305
        規(guī)格:100T/96S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體110 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體20 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×12-8℃保存
        試劑三液體4 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑四粉劑×2-20保存
        試劑五粉劑×12-8℃保存
        試劑六粉劑×2-20保存
        標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×1-20保存

        溶液的配制:

        1. 提取液低溫條件下,可能有結(jié)晶析出,放于60℃水浴加熱溶解即可,不影響使用。

        2. 試劑二:臨用前加入3.5 mL蒸餾水充分溶解,可加熱促進(jìn)溶解,2-8℃可保存4周;

        3. 試劑四:臨用前1加入0.2 mL蒸餾水溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存2周,避免反復(fù)凍融;

        4. 試劑五:臨用前加入1 mL蒸餾水充分溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融;

        5. 試劑六:臨用前1加入0.25 mL蒸餾水備用,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融;

        6. 標(biāo)準(zhǔn)品:5 mg ATP。臨用前加入0.826 mL蒸餾水配成10 μmol/mLATP標(biāo)準(zhǔn)溶液,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融;

        7. 工作液的配制:臨用前請(qǐng)按試劑二(mL):試劑三(mL):試劑四(mL):試劑五(mL):試劑六(mL)=0.20.2:0.020.080.02的比例配制0.52mL,約10T的量),現(xiàn)配現(xiàn)用。

        產(chǎn)品說明:
        ATP廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測(cè)定ATP 含量并且計(jì)算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。

        HK催化葡萄糖和ATP合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH,NADPH340nm有特征吸收峰,NADPHATP含量成正比,以此反應(yīng)ATP含量。


        技術(shù)指標(biāo):
        低檢出限:0.0026 μmol/mL
        線性范圍:0.01953-3 μmol/mL

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
        自備的儀器和用品
        紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/ 96孔UV板、研缽/勻漿器、蒸餾水、冰和氯仿。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        注意事項(xiàng)

        1. 加入提取液離心后的上清若為渾濁為正常現(xiàn)象。

        2. 如果吸光值大于1.5,建議將樣本用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測(cè)定。注意計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù);如果吸光值過低或接近空白,建議加大樣本量后進(jìn)行測(cè)定,注意同步修改計(jì)算公式。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取0.1g兔肺臟加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿,10000g 4℃離心10min,取上清至另一EP管中,加入500μL的氯仿充分震蕩混勻,10000g 4℃離心3min,取上清,置冰上按照測(cè)定步驟操作,使用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A2測(cè)定-A1測(cè)定=0.0873-0.065=0.0223,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A2標(biāo)準(zhǔn)-A1標(biāo)準(zhǔn)=0.4368-0.1435=0.2933按樣本質(zhì)量計(jì)算含量

        ATP含量(μmol/g 質(zhì)量)=0.625×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.625×0.0223÷0.2933÷0.1=0.475 μmol/g 質(zhì)量。

        1. 0.1g稗草加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿,10000g 4℃離心10min,取上清至另一EP管中,加入500μL的氯仿充分震蕩混勻,10000g 4℃離心3min,取上清,置冰上按照測(cè)定步驟操作,使用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A2測(cè)定-A1測(cè)定=0.5351-0.4969=0.0382ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A2標(biāo)準(zhǔn)-A1標(biāo)準(zhǔn)=0.4368-0.1435=0.2933,按樣本質(zhì)量計(jì)算含量

        ATP含量(μmol/g 質(zhì)量)=0.625×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.625×0.0382÷0.2933÷0.1=0.814 μmol/g 質(zhì)量。

        1. 取血清0.1mL 加入1mL 提取液,充分震蕩,10000g,4℃離心10min;取上清液至另一EP管中,加入500μL的氯仿充分震蕩混勻,10000g 4℃離心3min,取上清置冰上使用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算,ΔA測(cè)定=A2測(cè)定-A1測(cè)定=0.0569-0.0449=0.012ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A2標(biāo)準(zhǔn)-A1標(biāo)準(zhǔn)=0.4368-0.1435=0.2933,按液體體積計(jì)算含量得:

        ATP含量(μmol/mL) =6.875×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)=6.875×0.012÷0.2933=0.281 μmol/mL。
        相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):

        1. Meixi Peng,Dan Yang,Yixuan Hou,et al. Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis. Cell Death and Disease. March 2019;(IF5.959)

        2. Yang Wang,Jianhang Jiao,Shanyong Zhang,et al. RIP3 inhibition protects locomotion function through ameliorating mitochondrial antioxidative capacity after spinal cord injury. Biomedicine & Pharmacotherapy. August 2019;116.(IF3.743)

        3. Luo M,Luo Y, Mao N,et al. Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell


        Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication. Cellular Physiology
        and Biochemistry. November 2018;
        參考文獻(xiàn):

        1. Lin X, Wu Y, Chen X, et al. Determination of adenosine phosphate in tobacco leaf by UPLC with phenol-TEA pretreatment [J]. Acta Tabacaria Sinica, 2014, 20(1): 26-31.

        2. Beutler E, Mathai C K. A comparison of normal red cell ATP levels as measured by the firefly system and the hexokinase system[J]. Blood, 1967, 30(3): 311-320.

        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0060/BC0065   Na+k+-ATP酶活性檢測(cè)試劑盒
        BC0960/BC0965   Ca++Mg++-ATP酶活性檢測(cè)試劑盒
         

        ATP含量檢測(cè)試劑盒 微量法 ATP含量檢測(cè)試劑盒 微量法

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