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        • 過氧化氫酶(CAT)活性檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        過氧化氫酶(CAT)活性檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2025-04-24
        儲存條件
        2-8℃
        過氧化氫酶(CAT)活性檢測試劑盒 微量法
        有效期
        12個月
        單位

        推薦
        若使用96孔板測定,需使用96孔UV板,推薦貨號YA0602
        英文名稱
        Catalase(CAT) Activity Assay Kit
        別名
        過氧化氫酶試劑盒 CAT Kit 過氧化氫酶(CAT)試劑盒 過氧化氫酶(CAT)測試盒
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microp

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC3045
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是最主應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        過氧化氫酶(CAT)活性檢測試劑盒說明書

        微量法

        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。

        貨號:BC0205

        規(guī)格:100T/96S

        產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        提取液

        液體110 mL×1瓶

        2-8℃保存

        試劑一

        液體30 mL×1瓶

        2-8℃保存

        試劑二

        液體110 μL×1瓶

        2-8℃保存

        溶液的配制:

        1、 試劑二:液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中,使用前需先離心。

        2、 檢測工作液的配制:
        A. 使用96孔UV板:取試劑二25 μL中加入5mL試劑一,充分混勻,作為工作液(約26T),現(xiàn)用現(xiàn)配;也可根據(jù)樣本量按比例配制(提供115 mL空瓶)。
        B. 使用微量石英比色皿:取試劑二25 μL中加入6.5mL試劑一,充分混勻,作為工作液(約34T),現(xiàn)用現(xiàn)配;也可根據(jù)樣本量按比例配制(提供115 mL空瓶)。

        產(chǎn)品說明:

        CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是最主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。

        H2O2在240nm下有特征吸收峰,CAT能夠分解H2O2,使反應(yīng)溶液240nm下的吸光度隨反應(yīng)時間而下降,根據(jù)吸光度的變化率可計算出CAT活性。

        注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

        需自備的儀器和用品:

        紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96UV板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

        操作步驟:

        一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)

        1、細菌、細胞或組織樣本的制備:

        a、細菌或培養(yǎng)細胞:收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

        b、組織:按照組織質(zhì)量(g):稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

         

        2、血清(漿)樣本:直接檢測。

        二、測定步驟

        1、 分光光度計或酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至240nm,蒸餾水調(diào)零。

        2、 測定前將CAT檢測工作液在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。

        3、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本和190μL工作液,立即混勻并計時,記錄240nm下初始吸光值A11min后的吸光值A2。計算ΔA=A1-A2

        三、CAT活性計算

        a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

        1、血清(漿)CAT活力的計算:

        單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘催化1μmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

        CAT(U/mL)= [ΔA×V反總÷ε×d×106]÷V樣÷T=459×ΔA

        2、組織、細菌或細胞中CAT活力計算:

        (1)按樣本蛋白濃度計算:

        單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘催化1μmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

        CAT(U/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×106]÷(Cpr×V樣) ÷T=459×ΔA÷Cpr

        (2)按樣本質(zhì)量計算:

        單位的定義:每g組織每分鐘催化1μmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

        CAT(U/g 質(zhì)量)=[ΔA×V反總÷ε×d×106]÷(V÷V樣總×W÷T=459×ΔA÷W

        (3) 按細菌或細胞數(shù)量計算:

        單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘催化1μmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

        CAT(U/104 cell)=[ΔA×V反總÷ε×d×106]÷(V÷V樣總×500÷T =0.917×ΔA

        V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4L;εH2O2摩爾消光系數(shù),43.6 L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cmV樣:加入樣本體積,0.01mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,1min;W:樣本質(zhì)量,gCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;500:細胞或細菌總數(shù),500萬;106:單位換算系數(shù),1mol=106μmol。

        b.用96孔板測定的計算公式如下

        1、血清(漿)CAT活力的計算:

        單位的定義:每mL血清(漿)在反應(yīng)體系中每分鐘催化1μmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

        CAT(U/mL)=[ΔA×V反總÷ε×d×106]÷V樣÷T=764.5×ΔA

        2、組織、細菌或細胞中CAT活力計算:

        (1)按樣本蛋白濃度計算:

        單位的定義:每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘催化1μmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

        CAT(U/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×106]÷(Cpr×V樣) ÷T =764.5×ΔA÷Cpr

        (2)按樣本質(zhì)量計算:

        單位的定義:每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘催化1μmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

        CAT(U/g 質(zhì)量)=[ΔA×V反總÷ε×d×106]÷(V÷V樣總×W÷T=764.5×ΔA÷W

        (3) 按細菌或細胞數(shù)量計算:

        單位的定義:每1萬個細菌或細胞在反應(yīng)體系中每分鐘催化1μmol H2O2降解定義為一個酶活力單位。

        CAT(U/104 cell)=[ΔA×V反總÷ε×d×106]÷(V÷V樣總×500÷T=1.529×ΔA

        V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4L;εH2O2摩爾消光系數(shù),43.6 L/mol/cm;d96孔板光徑,0.6cm;V樣:加入樣本體積,0.01mLV樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,1min;W:樣本質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL500:細胞或細菌總數(shù),500萬;106:單位換算系數(shù),1mol=106μmol

        注意事項:

        如果反應(yīng)液有大量氣泡產(chǎn)生,將樣本用蒸餾水稀釋后再進行測定。

        相關(guān)發(fā)表文獻:

        [1] Zhang Z, Liu H, Sun C, et al. A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice[J]. Journal of plant physiology, 2018, 229: 100-110.

        [2] Yin Y J, Chen C J, Guo S W, et al. The fight against Panax notoginseng root-rot disease using zingiberaceae essential oils as potential weapons[J]. Frontiers in plant science, 2018, 9: 1346.

        [3] Yang Y, Li J, Wei C, et al. Amelioration of nonalcoholic fatty liver disease by swertiamarin in fructose-fed mice[J]. Phytomedicine, 2019, 59: 152782.

        [4] Chen G, Jia Z, Wang L, et al. Effect of acute exposure of saxitoxin on development of zebrafish embryos (Danio rerio) [J]. Environmental Research, 2020: 109432.

        參考文獻:

        [1] Catalase in vitro. [J]. Methods Enzymol, 105:121-126.

        [2] Johansson L H, Borg L A H. A spectrophotometric method for determination of catalase activity in small tissue samples[J]. Analytical biochemistry, 1988, 174(1): 331-336.

        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC0190/BC0195  多酚氧化酶(PPO)活性檢測試劑盒

        BC0210/BC0215  苯丙*酸解氨酶(PAL)活性檢測試劑盒

        BC0170/BC0175  超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒

        BC0090/BC0095  過氧化物酶(POD)活性檢測試劑盒

        過氧化氫酶(CAT)活性檢測試劑盒 微量法 過氧化氫酶(CAT)活性檢測試劑盒 微量法

         


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