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        • 土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)活性檢測(cè)試劑盒
        產(chǎn)品名稱:

        土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)活性檢測(cè)試劑盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2025-04-24
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        中文名稱
        土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)活性檢測(cè)試劑盒
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Soil Acid Invertase(S-AI) Activity Assay Kit
        檢測(cè)方法
        可見分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/24S
        自備試劑
        該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC3070
        規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)活性檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)活性檢測(cè)試劑盒說明書
        可見分光光度法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
        貨號(hào):BC3070
        規(guī)格:50T/24S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        試劑一液體100 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×22-8℃保存
        試劑三液體30 mL×1瓶2-8℃保存
        標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 試劑二:臨用前取1瓶加入15 mL試劑一充分溶解備用,用不完的試劑2-8℃保存2周;

        2. 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg無水葡*糖。臨用前加入1 mL試劑一充分溶解,制備10 mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液待用,2-8℃保存兩周。

        產(chǎn)品說明:
        S-AI在pH4.5~5.0(酸性)條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。S-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與 3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在540nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)540nm光吸收增加速率與S- AI活性成正比。




        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
        需自備的儀器和用品:
        可見分光光度計(jì)、恒溫培養(yǎng)箱/水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水、30-50目篩、甲苯(不允許快遞)。
        操作步驟:
        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可參考文獻(xiàn))
        新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
        二、測(cè)定步驟

        1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,蒸餾水調(diào)零。

        2. 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋:將10mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液用試劑一稀釋至0.2、0.15、0.10.08、0.06mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液備用。

        3. 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋表


        序號(hào)稀釋前濃度(mg/mL)標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL)試劑一體積(µL)稀釋后濃度(mg/mL)
        11010019000.5
        20.54006000.2
        30.53007000.15
        40.52008000.1
        50.51608400.08
        60.51208800.06

        備注:試驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需標(biāo)準(zhǔn)品800µL。

        1. 樣本測(cè)定:

        試劑名稱測(cè)定管對(duì)照管標(biāo)準(zhǔn)管空白管
        風(fēng)干土樣(g)0.10.1--
        試劑一(μL-800-800
        試劑二(μL800---
        標(biāo)準(zhǔn)液(μL--800-
        甲苯(μL20202020
        混勻,于37℃水浴/恒溫培養(yǎng)箱準(zhǔn)確反應(yīng)1h后,煮沸10min左右(蓋緊,以防止水分散失),流水或冰浴冷卻后充分混勻(以保證濃度不變),10000rpm,常溫離心10min,取上清。
        上清(μL700700700700
        試劑三(μL300300300300

        混勻,煮沸10min左右(蓋緊,以防止水分流失),流水冷卻后,540nm處蒸餾水調(diào)零,記錄各管吸光值A,記為A測(cè)定管、A對(duì)照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測(cè)1-2次。
        三、S-AI活性計(jì)算

        1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

        根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(x,mg/mL)和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(y,ΔA標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測(cè)定(y,ΔA測(cè)定)帶入公式計(jì)算樣本濃度(xmg/mL)。

        1. S-AI活性計(jì)算

        單位定義:37℃每g土壤每天產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個(gè)酶活性單位。
        S-AI(U/g 土樣)=x×V÷W÷T=19.2×x÷W
        V:加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積,0.8mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間:1/24d
        注意事項(xiàng):
        1、如果加入試劑三,煮沸10min后有混濁物出現(xiàn),建議離心除去沉淀(10000rpm,2min),取上清測(cè)定吸光度;
        2、如果吸光值大于1,可以將上清液再進(jìn)行稀釋;若吸光值較小,可以減少上清液稀釋倍數(shù)。兩種操作均要注意改變公式中的稀釋倍數(shù)。
        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取兩管0.1g林土,即為測(cè)定管和對(duì)照管,按照測(cè)定步驟操作,記為A測(cè)定管、A對(duì)照管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.425-0.054=0.371,標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=6.0331x-0.3103,x=0.113,計(jì)算酶活得:S-AI(U/g 土樣)=19.2×x÷W=19.2×0.113÷0.1=21.696 U/g 土樣。

        2. 取兩管0.1g林土,即為測(cè)定管和對(duì)照管,按照測(cè)定步驟操作,記為A測(cè)定管、A對(duì)照管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.410-0.055=0.355,標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=6.0331x-0.3103,x=0.110,計(jì)算酶活得:

        S-AI(U/g 土樣)=19.2×x÷W=19.2×0.110÷0.1=21.12 U/g 土樣。
        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC4040/BC4045  土壤中性轉(zhuǎn)化酶(S-NI)活性檢測(cè)試劑盒
        BC0240/BC0245  土壤蔗糖酶(S-SC)活性檢測(cè)試劑盒

        土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)活性檢測(cè)試劑盒 土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)活性檢測(cè)試劑盒


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