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        • 二胺氧化酶測試盒
        產(chǎn)品名稱:

        二胺氧化酶測試盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2025-04-25
        二胺氧化酶測試盒:DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān),能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶貨號BC1285
        規(guī)格100管/48樣供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途二胺氧化酶活性測定

        二胺氧化酶測試盒 微量法

        注意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

        貨號:BC1285

        規(guī)格:100T/48S

         

        產(chǎn)品內(nèi)容:

        提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

        試劑一:液體 0.25mL×1 支,4℃保存。

        試劑二:液體 2mL×1 管,4℃保存。

        試劑三:液體 1mL×1 管,4℃保存。

         

        產(chǎn)品說明:

            DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物(腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān),能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。

            DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫,外源添加過量的辣根過氧化物酶,催化過氧化氫氧化鄰

        聯(lián)茴香胺生成氧化型鄰聯(lián)茴香胺,在460nm處有特征吸收峰,通過測定該波長吸光度增加速率,計算DAO活性。

         

        自備實驗用品及儀器:

            天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水。

         

        操作步驟:

        一、粗酶液提?。?/span>

        1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心20min,取上清,置冰上待測。

        2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

        3. 血清等液體:直接測定。

         

        二、測定操作表:

        1、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長460nm,蒸餾水調(diào)零。

        2、操作表

         

        對照管

        測定管

        粗酶液(μL

        50

        50

        提取液(μL

        128

        108

        試劑一(μL

        2

        2

        試劑二(μL

        20

        20

        試劑三(μL

         

        20

        混勻,37℃水浴30min,微量石英比色皿/96孔板,蒸餾水調(diào)零,測定460nm吸光值。ΔA=A測定-A 對照

         

        三、酶活性計算公式:

        a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

        1)按樣本蛋白濃度計算:

             酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。

            DAO 活性(nmol/min/mg prot=A460÷ε×d×V 反總÷V ×Cpr÷T= 18×A 460 ÷Cpr

        2)按樣本質(zhì)量計算:

            酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

             DAO 活性(nmol/min/g=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷V 樣總×W÷T= 18×A 460 ÷W

        3)按細(xì)胞數(shù)量計算:

             酶活性定義: pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

        DAO 活性(nmol/min/104cell=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T= 18×A460 ÷細(xì)胞數(shù)量

         (4) 按液體體積計算

             酶活性定義: pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

            DAO 活性(nmol/min/mL=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷T= 18×A460

            ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V 樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr

            樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,gT:反應(yīng)時間,30min

        b.  96 孔板測定的計算公式如下

        1)按樣本蛋白濃度計算:

            酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。

            DAO 活性(nmol/min/mg prot=A460÷ε×d×V 反總÷V ×Cpr÷T= 36×A 460 ÷Cpr

        2)按樣本質(zhì)量計算:

             酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

            DAO 活性(nmol/min/g=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷V 樣總×W÷T= 36×A460÷W

        3)按細(xì)胞數(shù)量計算:

              酶活性定義: pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

        DAO 活性(nmol/min/104cell=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T   = 36×A460÷細(xì)胞數(shù)量

        (4) 按液體體積計算

             酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。

            DAO 活性(nmol/min/mL=A460÷ε×d×V 反總÷V ÷T= 36×A460

            ε :氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L /mmol/cmd96 孔板光徑,0.5cm;V 反總:

            反應(yīng)總體積,0.2mL;V 樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時間,30min

         

        注意事項:

         1、如果OD值小于0.01,適當(dāng)加大提取用樣本量;OD值大于0.8,粗酶液可適當(dāng)稀釋,或者減少提取用樣本量。

            2、樣品蛋白質(zhì)含量需要另外測定。

         

        二胺氧化酶測試盒訂購說明:

        1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
        2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
        3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。 
        4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
        5、請辦理完貨款后,將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


        運輸說明:

        極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
        低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
        常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。

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